بررسی مقایسه ای بیان ژن گیرنده ی شبه تول 4 (tlr4) در سلول های تک هسته ای خون سگ های نژاد تریر(terrier) مبتلا به آلرژی پوستی ناشی از درماتیت آتوپیک و غیر آتوپیک به روشreal-time quantitative(q)pcr

درماتیت آتوپیک، درماتوزی شایع در سگ ها و در واقع دومین دلیل ایجاد خارش در آن هاست. این بیماری به عنوان یک بیماری پوستی خارش دار و التهابی با زمینه ی ژنتیکی همراه با تظاهرات مشخص بالینی، شناخته می شود. نقش کلیدی را در این بیماری، ایمنوگلوبولین های e برعهده دارند که اغلب درمقابل آلرژن های محیطی تولید می شوند. شواهدی روز افزون نشان دهنده ی وجود نقص هایی در سیستم ایمنی ذاتی است که مجموعاً می توانند بر بروز و شدت درماتیت‎‎ آتوپیک اثر بگذارند. اختلال در بیان ژن گیرنده های شبه تول، می تواند یکی از این علل رخداد علایم بالینی خاص در درماتیت ‎‎آتوپیک باشد. به غیر از درماتیت آتوپیک بسیاری از درماتیت ها با منشا آلرژیک در سگ سانان شناسایی شده اند که علایم این بیماری را تقلید کرده و از تشخیص های تفریقی آن به حساب می آیند. در مطالعه ی حاضر، بیان ژن گیرنده ی شبه تول 4 (tlr4) در سلول های تک هسته ای خون سگ- های نژاد تریر مبتلا به آلرژی پوستی ناشی از درماتیت آتوپیک و غیر آتوپیک به روش real-time quantitative pcr (qpcr) مورد ارزیابی قرار گرفت. بدین منظور از بین سگ های مبتلا به بیماری های پوست و مو، مراجعه کننده به بیمارستان آموزشی دانشکده ی دامپزشکی دانشگاه فردوسی مشهد (در بازه ی زمانی مهرماه 1390 تا تیرماه 1391)، تعداد 24 قلاده سگ در سه گروه مورد مطالعه قرار گرفتند:8 سگ مبتلا به درماتیت آتوپیک, 8 سگ مبتلا به درماتیت های آلرژیک غیر آتوپیک, 8 سگ سالم (فاقد بیماری پوست و مو). پس از اخذ نمونه ی خون از سگ های مورد مطالعه، در شرایط سترون، سلول های تک هسته ایی خون محیطی جدا شدند. سپس rna تام از پلت های pbmc خون سگ ها استخراج گردید. در ادامه رونوشت برداری معکوس و ساخت cdna صورت گرفت. محصولات حاصله با پرایمرهای اختصاصی tlr4تحت فرایند pcr معمولی و qpcr قرار گرفتند. محصولات فرایند pcr معمولی تحت انجام الکتروفورز قرار گرفته و باند های اختصاصی ژن tlr4در محل مورد انتظار بر روی ژل مشاهده شدند. همچنین منحنی ذوب حاصل از فرایند qpcr پیک منفرد حاصل از بیان ژن را در دمای صحیح نشان داد . نتایج حاصل از انجام تجزیه و تحلیل آماری تغییرات بیان ژن به علت ایجاد اختلالات مشاهده شده در استاندارد سازی و تنظیم دقیق`آزمون qpcr ،غیر قابل اتکا تلقی شده و بنابراین نیاز به انجام مطالعات بیشتری بر روی جنبه های مولکولی سیستم ایمنی مبتلایان به درماتیت های آلرژیک همچنان وجود دارد.